کلاسیک سوین فیور ویروس انټي باډي الیسا کټ

مشخصات

 

 

د ازموینې پروسیجرونه او تفسیر

 

مرحله 1 د ازموینې طرزالعمل

1.1 د مینځلو حل چمتو کول

Wد تمرکز تمرکز wخړوبونکی مایع:د کارولو دمخه، د مینځلو محلول باید د خونې د تودوخې (20-25 درجې) ته بیرته راګرځول شي او په مساوي ډول وغورځول شي ترڅو یونیفورم شي. بیا 20 ځله د مینځلو متمرکز محلول په پاکو اوبو سره حل کړئ (د مثال په توګه ، 5 ملی لیتر متمرکز مینځل محلول په 95 ملی لیتر پاکو اوبو کې اضافه کیږي) ، ښه مخلوط کړئ ، او د مینځلو مینځل شوي مایع د 7 ورځو لپاره په 2-8 درجو کې زیرمه کیدی شي.

1.2 د نمونې چمتو کول

① د ټول څارویو وینه واخیستل شوه، د 10 دقیقو لپاره په 4000rpm کې سینټرفیوج شوه، او سپرناټینټ راټول شو. سیرم هم په طبیعي ډول د هیمولیسس پرته جمع کیدی شي.

② د سیرم ډیلیشن پلیټ کې د ازموینې لپاره 10 ځله سیرم کم کړئ (د مثال په توګه: 15ul سیرم اضافه کړئ ترڅو د 135ul نمونې ډیلیونټ کې ازموینه وشي).

یادونه: منفي او مثبت کنټرولونه باید کم نه شي.

1.3 د ازموینې طرزالعمل

① د انزایم لیبل مایکروپلیټ واخلئ (د نمونو د شمیر له مخې ، څو ځله جلا کیدی شي او کارول کیدی شي) ، د انزایم لیبل مایکروپلیټ ته د 100ul منحل شوي سیروم اضافه کړئ ، د منفي کنټرول او مثبت کنټرول لپاره دوه څاګانې تنظیم کړئ او په ترتیب سره عکس العمل ته 100ul اضافه کړئ. نمونه په نرمۍ سره په څاه کې وخورئ، د پلیټ پوښلو لپاره د سیل کولو پلیټ فلم په کارولو سره، او د 30 دقیقو لپاره په 37 درجو کې سینه کړئ.

②د سیل کولو پلیټ فلم خلاص کړئ، په پلیټ کې محلول په ښه توګه وخورئ، په هر څاه کې 300µl کاري غلظت د مینځلو مایع اضافه کړئ، او بیا په څاه کې مایع پریږدئ. پورتنۍ مرحلې 5 ځله تکرار کړئ، او په پای کې په پاک جاذب کاغذ کې وچ کړئ.

③ هر څاه ته 100µl انزایم کنجوګیټ اضافه کړئ، پلیټ پوښ کړئ، او د 30 دقیقو لپاره په 37 درجو کې سینګار کړئ.

④ د سیل کولو پلیټ فلم خلاص کړئ ، په پلیټ کې محلول په ښه توګه وخورئ ، په هر څاه کې د 300µl کاري غلظت مینځلو مایع اضافه کړئ ، او بیا په څاه کې مایع پریږدئ. پورتنۍ مرحلې 5 ځله تکرار کړئ، او په پای کې په پاک جاذب کاغذ کې وچ کړئ.

⑤ هر څاه ته د 100µl سبسټریټ محلول اضافه کړئ، پلیټ پوښ کړئ او د 10 دقیقو لپاره په 37 درجو کې د رڼا څخه لرې وساتئ.

⑥هر څاه ته 50µl سټاپ محلول اضافه کړئ، او پایله یې په 5 دقیقو کې معلومه کړئ.

 

مرحله 2 د پایلې تشریح

د هر څاه OD450 ارزښت د 96 څاه مایکروپلیټ ریډر کې لوستل شوی.

2.1 اعتبار

د منفي کنټرول اوسط OD450nm ارزښت <0.2 و او د مثبت کنټرول اوسط OD450nm ارزښت د 0.7 څخه ډیر یا مساوي و، تجربې پایلې معتبرې وې. که نه نو، ازموینه باید تکرار شي.

2.2 د محاسبې طریقه

د هرې نمونې لپاره، د سمې نمونې او کنټرول ارزښتونو په کارولو سره S/P په لاندې ډول محاسبه کړئ:

2.3 د پایلې تفسیر

کله چې S/P <0.2 وي، دا د منفي په توګه قضاوت کیږي.

کله چې S/P > 0.3، دا د مثبت په توګه قضاوت کیږي.

کله چې 0.2 د S/P څخه کم یا مساوي له 0.3 څخه کم یا مساوي وي، دا د شک په توګه قضاوت کیږي، او وړاندیز کیږي چې نمونې بیا تکرار کړي او یوه اونۍ وروسته ازموینه وکړي.

 

هوښيار ټکي: د کلاسیک سوین فیور ویروس انټي باډي ایلیسا کټ ، د چین کلاسیک سوین فیور ویروس انټي باډي ایلیسا کټ عرضه کونکي ، جوړونکي ، فابریکه